重组蛋白酶K
目录号：MPTK-1（1g）
目录号：MPTK-10（10g）
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简介
蛋白酶K是现有蛋白酶中活性最高的品种之一，来源于林伯氏白色念球菌（Tritirachium album limber）的蛋白酶K基因。本产品是由重组酵母表达的基因重组蛋白质，在酶分子结构设计上，参考国内外文献，做了六个定点突变，理论上可以提高酶活性50倍。
蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。在pH 4到pH 12的条件下均有活性，在SDS、尿素或EDTA存在时亦很稳定。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键，用于生物样品中蛋白质的降解。此酶经脱色和色谱纯化去除了RNA和DNA，也检测不到其它杂酶活性。
由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定，还具有降解天然蛋白质的能力，因而它应用很广泛，主要用在基因诊断试剂盒、基因组DNA提取试剂盒、RNA提取试剂盒中去除DNA和RNA制备中的核酸酶，也可以用于提取组织中非蛋白成份降解含有蛋白质的杂质。譬如DNA疫苗和肝素的制备等。
基本信息
- 货号：MPTK
- 规格：每个独立包装中含有100毫克的蛋白酶K（或者客户包装）
- 比活性值： ≥30 U/mg干重。
- 来源种属：林伯氏白色念球菌（Tritirachium album limber）
- 分子质量：29,730
贮存和使用：
干粉状态可在0~4ºC条件下低温保藏。溶解后分装为适当体积，-20ºC贮存。运输可在室温下进行。
正确的贮存条件下，干粉状态的有效期可达一年。液体状态在-20ºC有效期为半年。打开包装使用后，如果在2~8ºC环境下放置超过一周时间，建议过滤除菌或增加稳定剂，防止微生物污染。
贮存和稀释缓冲液：50 mM Tris-HCL缓冲液,2mM CaCL2 (pH 8.0)。
质量控制：
- 活性单位定义：37ºC、pH 7.5条件下，每分钟可水解底物酪蛋白生成1 µmol酪氨酸的蛋白酶K 的量，定义为一个单位（U）。
- 脱氧核糖核酸酶残留：以λ DNA为底物，37ºC消化6小时以上，未检测到脱氧核糖核酸酶活性。
- 核糖核酸酶残留：25ºC消化16小时以上，未检测到核糖核酸酶活性。
酶活测定和稳定性试验:
(1) 酶活测定 Sigma-Aldrich 方法：
(2)纯度和消化蛋白测试（SDS-PAGE）
结果: 蛋白质纯度超过 99% （激光扫描 SDS-PAGE胶）
(3) 稳定性测试：（一年数据）
结论：冻干粉正确储存一年内活性不变；液体酶酶活半年内降低小于5%。
重组蛋白酶K被收录在2019年3月8日Science期刊的New Products上，请访问
http://science.sciencemag.org/content/363/6431/1109
赛百盛被国际第三方市场研究机构评为蛋白酶K领域的全球主要行业参与者之一。有关详细信息，请访问
仅用于研究，不用于治疗人类或动物
北京赛百盛基因技术有限公司是冷泉港实验室的长期赞助合作伙伴