Cell-Free克隆系统
来自合成生物学企业Oriciro Genomics,无需大肠杆菌的质粒扩增方案
什么是Cell-Free克隆系统?
Cell-Free克隆系统(OriCiro® Cell-Free Cloning System)是一个革命性的基因操作工具,可以进行无细胞体系的组装和扩增质粒,而无需对大肠杆菌转化和培养。该产品不仅可以大大简化您的实验流程,还可以扩大您可操作的DNA/质粒范围。本产品由Cell-Free组装试剂盒和Cell-Free扩增试剂盒组成。
Cell-Free组装试剂盒
在Cell-Free组装试剂盒中,DNA片段通过具有同源序列的重叠端组装。首先,片段的每一端都被核酸外切酶消化以暴露单链同源序列。然后,用酶对彼此具有同源序列的相应片段进行退火。该试剂盒在一次等温酶反应中可以同时组装多达50个DNA片段,组装得到的环状DNA可以直接使用Cell-Free扩增试剂盒进行扩增。
优势
Cell-Free扩增试剂盒
Cell-Free扩增试剂盒包含了26种在大肠杆菌染色体复制周期中需要的酶。该试剂盒能够在等温条件下指数扩增具有oriC的环状DNA,10μl反应中可扩增出高达1μg的超螺旋环状DNA。
优势
试剂盒组成
储存条件
Cell-Free克隆系统采用干冰运输。收到试剂盒后,必须立即在低于-70°C的温度下储存。2X RA Mix和10X RE Mix含有酶,必须避免重复冻融,尽管至少可以进行三次冻融而不会丧失功能。在-70°C下再次储存前,必须用液氮或干冰乙醇快速冷冻10X RE Mix。尽管2X RA Mix、oriC Cassette*、Control Fragment、5X Buffer I和5X Buffer II可在-20°C下储存,但为了方便起见,包括10X RE Mix在内的所有成分可在-70°C下一起储存。
*oriC Cassette是包含oriC(大肠杆菌染色体复制起始点)序列的378 bp DNA片段。oriC Cassette的两端与Control Fragment(7.5 kb)有40 bp的重叠序列。
Cell-Free克隆系统说明书
关于 OriCiro Genomics
OriCiro Genomics 创办于2018年,致力于开发和商业化不依赖细胞的基因组规模大片段DNA扩增技术。拥有被称为OriCiro Cell-Free Cloning System的技术平台,可用于制药、诊断、农业和食品工业。其产品可以在一天之内合成和扩增最大片段50kb的DNA(产品分为科研和企业级),以及能提供合成和扩增最大片段200kb以下的DNA的CRO服务。同时公司也开放技术许可、定制化试剂等多种方式的合作。
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