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    Cell-Free克隆系统

    来自合成生物学企业Oriciro Genomics,无需大肠杆菌的质粒扩增方案

  • 什么是Cell-Free克隆系统?

     

    Cell-Free克隆系统(OriCiro® Cell-Free Cloning System)是一个革命性的基因操作工具,可以进行无细胞体系的组装和扩增质粒,而无需对大肠杆菌转化和培养。该产品不仅可以大大简化您的实验流程,还可以扩大您可操作的DNA/质粒范围。本产品由Cell-Free组装试剂盒和Cell-Free扩增试剂盒组成。

     

     

    Cell-Free组装试剂盒

     

    在Cell-Free组装试剂盒中,DNA片段通过具有同源序列的重叠端组装。首先,片段的每一端都被核酸外切酶消化以暴露单链同源序列。然后,用酶对彼此具有同源序列的相应片段进行退火。该试剂盒在一次等温酶反应中可以同时组装多达50个DNA片段,组装得到的环状DNA可以直接使用Cell-Free扩增试剂盒进行扩增。

     

    优势

    • 通过等温酶反应进行高效连接。
    • 多达50个DNA片段可以按照设计组装在一起。
    • 可组装高达50kb的DNA片段。

     

     

    Cell-Free扩增试剂盒

     

    Cell-Free扩增试剂盒包含了26种在大肠杆菌染色体复制周期中需要的酶。该试剂盒能够在等温条件下指数扩增具有oriC的环状DNA,10μl反应中可扩增出高达1μg的超螺旋环状DNA。

     

    优势

    • 在体外重建大肠杆菌基因组复制系统。
    • 可以由1个环状DNA分子扩增出10多亿个。
    • 扩增超过50kb的大环状DNA。
    • 超PCR 10000倍的保真度。
    • 通过在新的反应溶液中传代培养,可以连续扩增多代。
    • 扩增产物无需纯化即可转化进大肠杆菌。
    • 富含GC且难以通过PCR或大肠杆菌扩增的序列也可以被扩增。

     

    请参考下表了解Cell-Free克隆系统相对于传统的大肠杆菌克隆系统和PCR系统

  • 试剂盒组成

    Cell-Free组装试剂盒(5次)

    Cell-Free扩增试剂盒(10次)

  • 储存条件

    Cell-Free克隆系统采用干冰运输。收到试剂盒后,必须立即在低于-70°C的温度下储存。2X RA Mix和10X RE Mix含有酶,必须避免重复冻融,尽管至少可以进行三次冻融而不会丧失功能。在-70°C下再次储存前,必须用液氮或干冰乙醇快速冷冻10X RE Mix。尽管2X RA Mix、oriC Cassette*、Control Fragment、5X Buffer I和5X Buffer II可在-20°C下储存,但为了方便起见,包括10X RE Mix在内的所有成分可在-70°C下一起储存。

    *oriC Cassette是包含oriC(大肠杆菌染色体复制起始点)序列的378 bp DNA片段。oriC Cassette的两端与Control Fragment(7.5 kb)有40 bp的重叠序列。

  •  

    Cell-Free克隆系统说明书

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  • 关于 OriCiro Genomics

    OriCiro Genomics 创办于2018年,致力于开发和商业化不依赖细胞的基因组规模大片段DNA扩增技术。拥有被称为OriCiro Cell-Free Cloning System的技术平台,可用于制药、诊断、农业和食品工业。其产品可以在一天之内合成和扩增最大片段50kb的DNA(产品分为科研和企业级),以及能提供合成和扩增最大片段200kb以下的DNA的CRO服务。同时公司也开放技术许可、定制化试剂等多种方式的合作。

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北京赛百盛基因技术有限公司
北京赛百盛基因技术有限公司是中国早期提供定制寡核苷酸合成、基因合成和定制多肽合成的公司之一。自2000年成立以来,我们一直致力于利用科技创造我们引以为傲的未来。几十年来,通过提供更安全和更具性价比的产品,我们为30多个国家的研究人员提供科研服务,助力他们在生物学领域发现新的知识。
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