目录号：CCK-1 （1ml规格，100次）

目录号：CCK-5（5ml规格，500次）

目录号：CCK-25（25ml规格，2500次）

简介

CCK-8试剂盒是一种基于WST-8的高灵敏度试剂盒，广泛用于细胞增殖和细胞毒性的快速检测，可完美替代MTT检测方法。WST-8在存在电子耦合试剂（1-Methoxy PMS）的情况下，可被线粒体内的脱氢酶还原生成橙黄色的甲瓒产物（Formazan），甲瓒物的生成量与活细胞数量成正比。因此，可利用这一特性直接进行细胞增殖测定、毒性分析、药物筛选、肿瘤药敏试验等应用。

CCK-8试剂盒具有以下优点：

• 高灵敏度和良好的重现性。
• 操作简便，即开即用，方便快捷。
• 试剂具有水溶性，无需换液，特别适合于处理悬浮细胞。
• 对细胞具有较低的毒性，不会对细胞产生明显的影响。
• 适合于高通量药物筛选等大规模实验应用。

操作方法

1. 制备细胞悬液，并进行细胞计数。
2. 将细胞悬液接种到96孔板中，每孔100 μl，包含2000至5000个细胞左右（具体每孔所用的细胞数目需根据实验确定），同样的样本可接种2-3个重复孔。
3. 在37°C培养箱中培养2-4小时，使细胞贴壁，或者过夜培养。对于悬浮细胞，可省略此步骤。
4. 加入10 μl的CCK-8溶液，加完试剂后轻轻敲击培养板以帮助混匀。
5. 在37°C培养箱中培养1-4小时。不同细胞类型形成的Formazan量不同，实际显色时间根据具体细胞确定最佳条件。
6. 使用酶标仪测定450nm吸光度：建议采用双波长进行测定，检测波长450-490nm，参比波长600-650nm。

备注

• 若暂时不测定吸光值，可以向每孔中加入10 μl 0.1 M的HCl溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存于室温。在24小时内测定，吸光度不会发生变化。
• 待测药物如果具有氧化性或还原性，可在加入CCK-8溶液之前更换新鲜的培养基，以排除药物的影响。如果药物影响较小，可以在培养基中加入等量药物作为空白对照，以减少影响。
• 在培养箱内培养时，培养板最外一圈的孔最容易干燥和挥发，可能导致体积不准确从而增加误差。可以在最外一圈的孔中只加入培养基或PBS，以避免这种误差。
• 气泡可能会干扰测定结果，因此在使用酶标仪检测前，需确保检测孔内没有气泡。

保存

4°C保质期为1年，-20°C保质期为2年，请避光保存。

仅用于研究，不用于治疗人类或动物

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