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Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 试剂盒

Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 试剂盒

¥78.00 - ¥698.00
CCK-8试剂盒是一种基于WST-8的高灵敏度试剂盒,广泛用于细胞增殖和细胞毒性的快速检测,可完美替代MTT检测方法。WST-8在存在电子耦合试剂(1-Methoxy PMS)的情况下,可被线粒体内的脱氢酶还原生成橙黄色的甲瓒产物(Formazan),甲瓒物的生成量与活细胞数量成正比。因此,可利用这一特性直接进行细胞增殖测定、毒性分析、药物筛选、肿瘤药敏试验等应用。
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目录号:CCK-1 (1ml规格,100次)

目录号:CCK-5(5ml规格,500次)

目录号:CCK-25(25ml规格,2500次)

 

简介

CCK-8试剂盒是一种基于WST-8的高灵敏度试剂盒,广泛用于细胞增殖和细胞毒性的快速检测,可完美替代MTT检测方法。WST-8在存在电子耦合试剂(1-Methoxy PMS)的情况下,可被线粒体内的脱氢酶还原生成橙黄色的甲瓒产物(Formazan),甲瓒物的生成量与活细胞数量成正比。因此,可利用这一特性直接进行细胞增殖测定、毒性分析、药物筛选、肿瘤药敏试验等应用。

CCK-8试剂盒具有以下优点:

  • 高灵敏度和良好的重现性。
  • 操作简便,即开即用,方便快捷。
  • 试剂具有水溶性,无需换液,特别适合于处理悬浮细胞。
  • 对细胞具有较低的毒性,不会对细胞产生明显的影响。
  • 适合于高通量药物筛选等大规模实验应用。

 

操作方法

  1. 制备细胞悬液,并进行细胞计数。
  2. 将细胞悬液接种到96孔板中,每孔100 μl,包含2000至5000个细胞左右(具体每孔所用的细胞数目需根据实验确定),同样的样本可接种2-3个重复孔。
  3. 在37°C培养箱中培养2-4小时,使细胞贴壁,或者过夜培养。对于悬浮细胞,可省略此步骤。
  4. 加入10 μl的CCK-8溶液,加完试剂后轻轻敲击培养板以帮助混匀。
  5. 在37°C培养箱中培养1-4小时。不同细胞类型形成的Formazan量不同,实际显色时间根据具体细胞确定最佳条件。
  6. 使用酶标仪测定450nm吸光度:建议采用双波长进行测定,检测波长450-490nm,参比波长600-650nm。

 

备注

  • 若暂时不测定吸光值,可以向每孔中加入10 μl 0.1 M的HCl溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存于室温。在24小时内测定,吸光度不会发生变化。
  • 待测药物如果具有氧化性或还原性,可在加入CCK-8溶液之前更换新鲜的培养基,以排除药物的影响。如果药物影响较小,可以在培养基中加入等量药物作为空白对照,以减少影响。
  • 在培养箱内培养时,培养板最外一圈的孔最容易干燥和挥发,可能导致体积不准确从而增加误差。可以在最外一圈的孔中只加入培养基或PBS,以避免这种误差。
  • 气泡可能会干扰测定结果,因此在使用酶标仪检测前,需确保检测孔内没有气泡。

 

保存

4°C保质期为1年,-20°C保质期为2年,请避光保存。

 

 

仅用于研究,不用于治疗人类或动物

 

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