多肽-寡核苷酸结合物
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在大多数情况下,多肽-寡核苷酸结合物的直接合成是不可能的,因为寡核苷酸和多肽合成的传统保护基策略是不相容的或仅难以相容的。根据这一点,首先单独合成寡核苷酸和多肽,然后通过反应性连接器,例如氮化物-炔烃(Click Chemistry)或硫醇-马来酰亚胺,将其连接起来。所得的肽-寡核苷酸结合物经HPLC纯化,并通过质谱法进行鉴定。
我们的服务包括以下特定服务:
- 咨询并确定个别耦合策略(硫醇-马来酰亚胺,炔烃-氮化物,氮化物-DBCO)以及寡核苷酸和多肽的方向。
- 寡核苷酸和多肽的单独合成、纯化和鉴定。
- 通过反应性连接器对个别组分进行化学结合。
- 通过特殊的HPLC梯度对结合物进行纯化。
- 使用质谱法和分析性HPLC和CE对结合物进行鉴定和验证。
寡核苷酸中的反应性linker可以位于3´-或5´-端,因此可以在两个方向上将寡核苷酸连接到多肽上。氮化物linker最好连接到肽的N-末端,而硫醇连接器,例如通过半胱氨酸,可以在内部或末端找到。
我们更喜欢通过氮化物和DBCO进行无铜连接来进行耦合。在这里,氮化物可以以N-末端的氮化己酸形式存在,或以C-末端的2-氨基-5-氮化-n-戊酸(Orn (N3))形式存在。DBCO可以位于寡核苷酸的5´-或3´-端。
在多肽-寡核苷酸结合物中,多肽与寡核苷酸共价结合。近年来,这些结构在多种用途上变得越来越重要,并通过以下几种有趣的选择得到了扩展:
- 通过耦合细胞渗透肽 (CPP) 改善反义寡核苷酸的膜透性和传输机制。
- 通过sortase反应将几种蛋白质与寡核苷酸共价连接(例如,三甘氨酸)。
- 亲和标记
- Flag标记(DYKDDDDK)用于抗体检测和特定高纯度的蛋白质分离。
- His标记(HHHHHH)用于通过固定化金属亲和色谱法纯化和分离蛋白质。
- c-myc标记(EQKLISEEDL, 表位标记)用于所需蛋白的细胞定位和纯化。
如果您需要带有进一步修饰的多肽-寡核苷酸结合物(例如,荧光染料)到寡核苷酸或肽,请随时联系我们。
赛百盛被国际第三方市场研究机构评为寡核苷酸合成领域的全球主要行业参与者之一。有关详细信息,请访问 Solid-phase Oligonucleotide Synthesis Market Strategy for Excellent Growth, Highest Revenue, Booming Growth Opportunities By 2029.
仅用于研究,不用于治疗人类或动物
北京赛百盛基因技术有限公司是冷泉港实验室的长期赞助合作伙伴